口感是藥物作用于機(jī)體的第一感覺(jué)，它直接影響了患者服藥的依從性，但大多數(shù)藥物都具有不良口感。藥物的不良口感包括酸、苦、咸等，其中苦味最讓人難以接受。鹽酸左西替利嗪是眾多苦味藥物之一。利用電子舌技術(shù)，通過(guò)添加矯味劑中常用的甜味劑和環(huán)糊精對(duì)鹽酸左西替利嗪進(jìn)行掩味研究，并利用人工口嘗對(duì)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。

        材料

        儀器

        ASTREEⅡ電子舌

        藥物與主要試劑

        鹽酸左西替利嗪原料藥、鹽酸小檗堿、β-環(huán)糊精等

        方法與結(jié)果

        儀器性能檢測(cè)

         電子舌檢測(cè)步驟

        首先需要使用新鮮制備的0.01mol·L−1的鹽酸溶液對(duì)7個(gè)傳感器進(jìn)行預(yù)平衡及校準(zhǔn)，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定8次，并取后3次數(shù)值進(jìn)行分析，且于每2個(gè)待測(cè)樣品中間放入1個(gè)裝有清水的小燒杯進(jìn)行清洗，以防交叉污染。

        電子舌重現(xiàn)性檢測(cè)

        制備1份質(zhì)量濃度為1.25mg·mL−1的鹽酸左西替利嗪溶液，利用電子舌重復(fù)測(cè)定8次，記錄各傳感器響應(yīng)值，并計(jì)算RSD值，具體結(jié)果見(jiàn)表1，儀器重現(xiàn)性良好。

                                                                                                            表1 電子舌重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

                                                                     

        待測(cè)中間體溶液濃度的確定

        志愿者招募及培訓(xùn)

        首先招募6名身體健康的成年志愿者（3名男性、3名女性）作為評(píng)分人員。具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表3。具體培訓(xùn)方式為：每名志愿者口含20mL參比制劑，從舌尖到舌根充分感受溶液的苦度，15s后吐出，后用水漱口3次，間隔半小時(shí)后再口嘗下一個(gè)樣品。志愿者需對(duì)每個(gè)濃度的鹽酸小檗堿溶液進(jìn)行充分感受，使得對(duì)每個(gè)苦度的評(píng)分都有充分認(rèn)知。

                                                                                                                                  表3 苦味評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

                                          

        待測(cè)中間體溶液濃度制備系列濃度的鹽

        酸左西替利嗪溶液，質(zhì)量濃度分別為0.10、0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50mg·mL−1，志愿者分別對(duì)不同濃度的溶液口嘗并進(jìn)行苦味評(píng)分，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示，并最終選擇苦度等級(jí)為Ⅳ的溶液作為待測(cè)中間體溶液。當(dāng)溶液苦度等級(jí)為Ⅳ時(shí)，志愿者不僅能充分感知到可以接受的苦度，而且有利于后期觀察矯味劑的改善效果。因此最終選擇苦度值為4.00，質(zhì)量濃度為1.25mg·mL−1的溶液作為待測(cè)中間體溶液。

                                                                 

                                                                                                                                              圖1 系列濃度苦度值評(píng)分

        甜味劑種類(lèi)的篩選

       用0.5%的甜菊糖苷和新橙皮苷二氫查爾酮、0.3%的阿斯巴甜和三氯蔗糖、10%的甘露醇制備添加相應(yīng)濃度甜味劑的鹽酸左西替利嗪溶液（質(zhì)量濃度為1.25mg·mL−1）作為待測(cè)溶液，利用主成分分析法（PCA）對(duì)電子舌傳感器信號(hào)進(jìn)行分析，且根據(jù)樣品間的相對(duì)距離越近，則樣品滋味越接近這一原理，通過(guò)計(jì)算不同甜味劑到待測(cè)中間體溶液的標(biāo)準(zhǔn)化歐式距離（SED）確定甜味劑種類(lèi)。

                                                                  

                                                                                                                            圖2 甜味劑種類(lèi)碎石圖

        由圖2可知，主成分1及主成分2的特征值大于1，而由圖3可知主成分1的貢獻(xiàn)率為78.0%，主成分2的貢獻(xiàn)率為21.0%，它們的累積貢獻(xiàn)率為99.0%，2個(gè)主成分可以很好地代表原始數(shù)據(jù)。且從圖4可以看到，未矯味的鹽酸左西替利嗪原液、甘露醇、甜菊糖苷、新橙皮苷二氫查爾酮、三氯蔗糖、阿斯巴甜在PC1軸上由左向右依次排列，且計(jì)算各甜味劑到待測(cè)中間體溶液的SED值較大的為阿斯巴甜和三氯蔗糖，從圖4可以看到阿斯巴甜及三氯蔗糖在PC1軸上數(shù)值相近，主要差別體現(xiàn)在PC2軸上，表明兩種甜味劑效果相似。而阿斯巴甜本身是一種氨基酸類(lèi)高甜度甜味劑，氨基酸類(lèi)成分本身容易引起過(guò)敏，且制備過(guò)程發(fā)現(xiàn)阿斯巴甜溶解度較差，容易造成溶液渾濁，因此最終選擇效果相近、溶解度較好的三氯蔗糖作為甜味劑。

                                                              

                                                                                                                                                        圖3 甜味劑主成分貢獻(xiàn)率

                                                               

                                                                                                                      圖4 甜味劑PCA得分圖

        環(huán)糊精種類(lèi)及用量篩選

        在確定三氯蔗糖為甜味劑的基礎(chǔ)上再進(jìn)一步考察不同種類(lèi)及不同用量的環(huán)糊精對(duì)鹽酸左西替利嗪口味改善的情況。通過(guò)測(cè)定β-環(huán)糊精及羥丙基β-環(huán)糊精在用量為鹽酸左西替利嗪6、8及10倍條件用量的情況下電子舌傳感器的響應(yīng)值，并依舊通過(guò)PCA分析及計(jì)算SED值確定環(huán)糊精種類(lèi)及用量。

                                                                 

                                                                                                                            圖5 環(huán)糊精碎石圖

        如圖5碎石圖所示，特征值大于1的為主成分1及主成分2。如圖6所示，主成分1的貢獻(xiàn)率為82.1%，主成分2的貢獻(xiàn)率為15.5%，累積貢獻(xiàn)率達(dá)到97.6%，可以很好地代表原始數(shù)據(jù)。如圖7所示，已添加三氯蔗糖的鹽酸左西替利嗪溶液位于PC1軸的最右方，β-環(huán)糊精在PC1軸上的分布由右向左依次為6、8、10倍量，且它們都位于第二象限，及PC1軸上方，PC2軸左方。羥丙基β-環(huán)糊精在PC1軸上的分布由右向左也依次為6、8、10倍量，但分布在了3個(gè)象限。所以，無(wú)論是β-環(huán)糊精還是羥丙基β-環(huán)糊精均顯示添加的劑量越多，離鹽酸左西替利嗪溶液越遠(yuǎn)，即差距越大。10倍量的β-環(huán)糊精及羥丙基-β-環(huán)糊精的SED值相差并不大，在PCA圖上也可以看出兩者在PC1軸上數(shù)值相近，主要差別體現(xiàn)在PC2軸上。但比較6、8倍量環(huán)糊精的SED值可以看出β-環(huán)糊精的數(shù)值均比羥丙基-β-環(huán)糊精數(shù)值更大，即同等用量情況下，β-環(huán)糊精的整體掩味效果強(qiáng)于羥丙基-β-環(huán)糊精。而8、10倍量的β-環(huán)糊精的SED值相差不大，且志愿者口嘗發(fā)現(xiàn)它們口味相似，均能完全掩蓋苦味，因此最終選擇用量更少的8倍量的β-環(huán)糊精作為掩味劑。

                                                             

                                                                                                                 圖6 環(huán)糊精主成分貢獻(xiàn)率

                                                               

                                                                                                                  圖7 環(huán)糊精PCA得分圖

        口嘗驗(yàn)證

        6名志愿者根據(jù)前期的苦度培訓(xùn)，對(duì)添加了三氯蔗糖、8倍量β-環(huán)糊精掩味之后的鹽酸左西替利嗪溶液進(jìn)行口嘗評(píng)價(jià)，評(píng)分結(jié)果如表4所示。評(píng)分結(jié)果均處于等級(jí)Ⅰ，即幾乎沒(méi)有苦味，而從描述可以看到，志愿者均表示沒(méi)有嘗到苦味，甚至甜味明顯。

                                                                                                            表4 志愿者口嘗評(píng)分結(jié)果

                                                                  

        討論

        本研究以西替利嗪的活性成分鹽酸左西替利嗪作為研究對(duì)象，利用ASTREEⅡ電子舌對(duì)其進(jìn)行掩味分析。利用具有降維作用的PCA以及計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)化歐式距離的方法對(duì)電子舌傳感器信號(hào)值進(jìn)行分析，確定了甜味劑中掩味效果較好的為三氯蔗糖，環(huán)糊精中掩味效果較好的為8倍量的β-環(huán)糊精。并最終通過(guò)人工口嘗表明通過(guò)添加三氯蔗糖和β-環(huán)糊精可以完全掩蓋藥品的苦度，最終制備得到口感良好的鹽酸左西替利嗪溶液。